ELISA實驗操作要點:ELISA實驗總是遇到這些問題,怎么辦呀?
發布日期:2023/4/6 14:51:00


| 可能原因 |
解決方法 |
| 洗板不充分 |
將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保洗滌充分 |
| 確保在洗滌前棄掉了所有殘留抗體溶液 |
| 樣品或標準品中含干擾物 |
設置空白對照 |
| 緩沖液受污染 |
重新配制緩沖液 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 試劑添加順序錯誤或試劑配制有誤 |
重復實驗 |
| 檢查試劑配制方法 |
| 復核試驗試劑添加流程 |
| HRP被疊氮化合物污染 |
使用新鮮配制的試劑 |
| 抗體用量不足 |
使用推薦的抗體量 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 洗板不充分或跳過洗板步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶 |
嚴格按照說明書洗滌流程操作 |
| 封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染 |
每步均需使用新的封板膜或試劑儲液槽 |
| 緩沖液有金屬或HRP污染 |
配制新鮮緩沖液 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 實驗操作流程有誤 |
嚴格按照說明書操作流程 |
| 標準曲線稀釋計算錯誤 |
重新計算制作新的標準曲線 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 洗板不充分 |
將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保洗滌充分 |
| 重復使用封板膠紙 |
每步均需更換使用新的封板膠紙 |
| 未使用封板膠紙 |
需使用封板膠紙 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 洗板不充分 |
將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保洗滌充分 |
| 確保已在洗滌前棄掉所有殘留溶液 |
| 孵育溫度發生變化 |
嚴格按照推薦的溫度孵育 |
| 勿在環境溫度變化大的地方孵育 |
| 操作流程改變 |
嚴格按照相同的操作流程 |
| 封板膠紙重復使用導致HRP殘留污染 |
每一步均使用新的封板膠紙 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 樣品中無檢測物或表達量極低 |
設置陽性對照 |
| 重復實驗 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 酶標儀波長設置不正確 |
檢查酶標儀參數設置 |
| 包被的酶標板超過使用效期 |
更換新批次試劑盒 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 孵育溫度不均衡 |
孵育時使用封板膠紙 |
| 勿在環境溫度變化大的地方孵育 |

| 可能原因 |
解決方法 |
| 酶標板未處于正確溫度下 |
確保使用前酶標板和試劑處于室溫下 |
| 溶液污染 |
避免使用含NaN3的試劑 |
| ELISA操作前必讀 / 下載

