| 別稱
GLNS; GLUL; Glutamate-Ammonia Ligase; Glutamate decarboxylase
| GS 簡介
谷氨酰胺合成酶(GS)是一種酶,通過催化谷氨酸和氨的縮合形成谷氨酰胺,在氮的代謝中發揮著重要作用。谷氨酸+ATP+NH3→谷氨酰胺+ADP+磷酸鹽谷氨酰胺合成酶反應。谷氨酰胺合成酶使用由硝酸鹽還原、氨基酸降解和光呼吸產生的氨。谷氨酸的酰胺基是合成谷氨酰胺途徑代謝物的氮源。其他反應可能通過GS發生。銨離子和水之間的競爭、它們的結合親和力以及銨離子的濃度,影響著谷氨酰胺的合成和谷氨酰胺的水解。如果銨離子攻擊酰基磷酸鹽中間物,就會形成谷氨酰胺,而如果水攻擊中間物,就會重新生成谷氨酸。由于陽離子和帶負電荷的口袋之間的靜電作用,銨離子比水與GS結合得更牢固。另一個可能的反應是當NH2OH與GS結合,而不是NH4+,產生γ-谷氨酰羥胺。谷氨酰胺合成酶可以由8個、10個或12個相同的亞基組成,分成兩個面對面的環。
| 特異性
可檢測樣本中小鼠的GS,且與其類似物無明顯交叉反應。
| 典型數據及參考曲線
由于實驗操作條件的不同( 如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
| 濃度(ng/mL) |
20 |
10 |
5 |
2.5 |
1.25 |
0.625 |
0.31 |
0 |
| OD值 |
2.22 |
1.56 |
0.92 |
0.63 |
0.42 |
0.25 |
0.18 |
0.08 |
| 校正OD值 |
2.14 |
1.48 |
0.94 |
0.55 |
0.34 |
0.17 |
0.1 |
- |
| 重復性
板內變異系數小于10%,板間變異系數小于10%
| 回收率
在選取的健康小鼠血清、血漿、細胞培養上清中加入3個不同濃度水平的小鼠GS,計算回收率
| 樣本類型 |
范圍 |
平均回收率 |
| 血清(n=8) |
84-101 |
96 |
| 血漿(n=8) |
92-105 |
102 |
| 細胞培養上清(n=8) |
96-108 |
105 |
| 線性稀釋
分別在選取的4份健康小鼠血清、血漿、細胞培養上清中加入高濃度小鼠GS,在標準曲線動力學范圍內進行稀釋,評估線性。
| 稀釋比例 |
回收率(%) |
血清 |
血漿 |
細胞培養上清 |
| 1:2 |
范圍(%) |
84-95 |
88-96 |
90-110 |
| 平均回收率(%) |
91 |
93 |
96 |
| 1:4 |
范圍(%) |
89-103 |
87-108 |
105-115 |
| 平均回收率(%) |
94 |
98 |
108 |
注:ELISA試劑盒檢測范圍等數據,因檢測樣本 的不同而調整,實際數據以隨貨說明書為準。
